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| 产地 | 中国 |
| 品牌 | Solarbio |
| 货号 | P1120 |
| 用途 | Proteinase K，中文名为蛋白酶K。进口产品配置，不含DNas，不含RNase，可直接使用。可以用于消化各种蛋白。用于各种常见的分子生物学、细胞生物学等相关实验 |
| 包装规格 | 1ml |
| 纯度 | 10mg/ml% |
| CAS编号 | |
| 是否进口 | 否 |
蛋白酶K溶液
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蛋白酶K的主要作用：蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理，它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用，以增加探针与靶核酸结合的机会，提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时，都会对细胞的结构有一定的破坏，导致组织切片的脱落，细胞核 的消失，从而影响杂交结果。EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用，解决上述出现的问题，并能达到理想的染色效果。
蛋白酶K配制标准：20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K)：将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
蛋白酶k是一种枯草蛋白酶类的高活性蛋白酶，用于生物样品中蛋白质的一般降解。蛋白酶K不被金属离子、螯合剂(e.g. EDTA)、巯基试剂或胰蛋白酶/麋蛋白酶蛋白抑制剂失活。蛋白酶K也是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。它切割脂族氨基酸和芳香族氨基酸的羧基端肽键。
推荐反应缓冲液：
50mM?Tris-HCl (pH7.5),10mMCaCl2。
值得注意的是，蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理，它具有消化包围靶DNA
蛋白质的作用，以增加探针与靶核酸结合的机会，提高杂交信号。?但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时，都会对细胞的结构有一定的破坏，导致组织切片的脱落,细胞核的消失，从而影响杂交结果。EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用，解决上述出现的问题，并能达到理想的染色效果。
保存：
保存在－20℃冰箱里，避免反复冻融，有效保证12月
使用：
孵育温度为55至65℃，蛋白酶K?在65oC?的活性比?25oC的活性高12倍。在温度65?oC?之上迅速变性。在95oC?加热10分钟、使用PMSF等蛋白酶抑制剂或用苯酚/氯仿抽提均可失活。理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时；理想孵育时间为2小时。
蛋白酶K，是一种切割活性较广的丝氨酸蛋白酶。蛋白酶K的应用比较广泛。包括制备脉冲电泳的染色体 DNA，蛋白质印迹以及去除DNA和RNA制备中的核酸酶。蛋白酶K的一般工作浓度是50—100μg/ml。在较广的pH范围内(pH 4-12.5)均有活性。
蛋白酶K的主要作用：蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理，它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用，以增加探针与靶核酸结合的机会，提高杂交信号.但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时，都会对细胞的结构有一定的破坏，导致组织切片的脱落，细胞核 的消失，从而影响杂交结果。EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用，解决上述出现的问题，并能达到理想的染色效果。
蛋白酶K配制标准：20mg/ml蛋白酶K配制标准(proteinase K)：将200mg的蛋白酶K加入到9.5ml水中，轻轻摇动，直至蛋白酶K完全溶解。不要涡旋混合。加水定容到10ml，然后分装成小份贮存于-20℃。
蛋白酶K的保存：保存在-20℃冰箱里，避免反复冻融，有效保证12月。
蛋白酶k的使用方法：孵育温度为55至65℃，理想孵育温度为58℃，孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
在0.2-1%SDS或约10mM尿素存在的情况下，蛋白酶K显示更高的酶活性。蛋白酶K的常用工作浓度为0.05-1mg/ml，根据所用缓冲液是否含有SDS、尿素、pH是否适合、温度是否适合等因素确定具体的工作浓度。 常用浓度的EDTA、Triton X-100、Tween 20、Sarkosyl、盐酸胍对蛋白酶K的活力影响不大。
注意事项：
如果每次的使用量很小，可以适当分装后再使用。
为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
保存要求：-20℃保存，有效期一年。
产品类目：
1. 细胞培养试剂 ,2. 细胞培养耗材 ,3. 蛋白质提取 ,4. 蛋白质纯化 ,5. 蛋白质定量 ,6. 蛋白质电泳 ,7. 蛋白质 Marker,8.Western blot,9. 免疫组化 ,10. 抗体 ,11.SABC 试剂盒 ,12. 基因组和质粒提取试剂盒 ,13. 核酸提取相关试剂 ,14.DNA 电泳 ,15.DNA Marker,16.RNA 相关试剂 , 17.PCR,18.Southern blot,19. 基因工程 ,20. 生物培养 ,21. 碱基与核酸 ,22. 氨基酸 ,23. 多肽及蛋白质 ,24. 酶 ,25. 辅酶 ,26. 酶抑制剂 ,27. 维生素 ,28. 抗生素 ,29. 染色剂 ,30. 糖与碳水化合物 ,31. 生物缓冲液 ,32. 植物生长激素 ,33. 酸和盐分离效 ,34. 胺 ,35. 层析介质 ,36. 常用生化试剂 ,37. 其他生化试剂 ,38. 耗材 ,39. 标准品 ,40. 新增产品
参考文献：
《Liraglutide reduces hepatic glucolipotoxicity?induced liver cell apoptosis through NRF2 signaling in Zucker diabetic fatty rats》 作者:Jun Guo，Cai Li，Chunxiao Yang，Bing Li，Jie Wei，Yajun Lin，Peng Ye，Gang Hu，Jian Li 期刊:Molecular Medicine Reports 影响因子:1.851 PMID:29693190
