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产地 | 中国 |
品牌 | Solarbio |
货号 | R2000 |
英文名称 | RNA Viral Genome Extraction Kit |
包装规格 | 50T/100T |
纯度 | 现询客服% |
CAS编号 | |
别名 | RNA病毒基因组提取试剂盒 |
分子式 | 现询客服 |
RNA病毒基因组提取试剂盒
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产品编号 | 产品名称 | 规格 | 价格 |
R2000 | RNA 病毒基因组提取试剂盒 | 50T | 700.00 |
R2000 | RNA 病毒基因组提取试剂盒 | 100T | 1180.00 |
RNA 病毒基因组提取试剂盒说明
产品内容:
试剂盒组成 | R2000-50 | R2000-100 |
蛋白酶 K | 1ml | 2ml |
洗柱液 | 50ml | 50m l × 2 |
结合液 | 25ml | 50ml |
漂洗液 | 15ml | 30ml |
RNase free ddH2O | 15ml | 15ml × 2 |
RNase free 吸附柱 | 50 个 | 100 个 |
RNase free 收集管 (2ml) | 50 个 | 100 个 |
保存:室温(
产品简介:
本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取 RNA 病毒基因组,不适合于细胞等组织内 RNA 病毒基因组的提取。使用本试剂盒提取的基因组 RNA 可用于 RT-PCR 实验。
操作步骤:
使用前请先在漂洗液中加入一瓶新开启的无水乙醇,加入到离瓶口约 0.5-1cm 距离,盖好摇匀。所有离心步骤均在 2-8 ℃ 条件下进行。
1、 取病毒上清液 0.5ml , 12000rpm 离心 5min ,尽量吸尽上清使用,弃去沉淀(如无沉淀可省去此步)。
2、 向病毒上清中加入 20ul 10mg/ml 的蛋白酶 K ,充分混匀, 65 ℃ 消化 10min ,期间可颠倒离心管混匀数次。
3、 吸附柱前处理:从包装中取出吸附柱,放入收集管中,加入 700ul 洗柱液,室温放置 2 分钟, 2-8 ℃ 12000 rpm 离心 2min ,弃废液,将吸附柱放入收集管中待用。
4、 向病毒上清中加入 500ul 结合液,充分混匀。再向管中加入 400ul 无水乙醇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响 RNA 的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中,静置 2min 。(吸附柱的大容积为 750ul ,可分两次加入。一次吸附完离心后再将余下的混合液体加入柱中静置离心。)
5、 12000rpm 离心 2min ,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
6、 向吸附柱中加入 700ul 漂洗液 ( 使用前请先检查是否已加入无水乙醇 ) , 12000rpm 离心 1min ,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
7、 向吸附柱中加入 500ul 漂洗液, 12000rpm 离心 1min ,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
8、 12000rpm 离心 2min ,将吸附柱置于室温或
10 、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50ul-100ul 经
注意事项:
1、 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌,可能导致 RNase 污染。使用无 RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。
2、 样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 RNA 提取量也下降。
3、 若结合液中有沉淀,可在
4、 如果样品消化不彻底,后面的离心步骤中可能会出现堵柱子的情况,可适当延长离心时间。
5、 洗脱缓冲液的体积好不少于 50ul ,体积过小会影响回收效率。
6、 RNA 产物应保存在 -70 ℃ ,以防 RNA 降解。
7、 RNA 检测:得到的基因组 RNA 片段的大小与病毒的保存条件和种类等因素有关。由于病毒不含有核糖体 RNA ,所以常规电泳无法检测,只有后期实验才可检测到。 D260 值为 1 相当于大约 40 μg/ml 单链 RNA 。
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