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| 产地 | 中国 |
| 品牌 | Solarbio |
| 货号 | D2400 |
| 包装规格 | 50T/100T |
| 纯度 | 现询客服% |
| CAS编号 | |
| 别名 | DNA Viral Genome Extraction Kit |
DNA 病毒基因组提取试剂盒
货号: D2400
规格: 50T/ 100T
价格:400/700
保存: 室温 (15 ℃ -25 ℃ ) 干燥保存,复检期 12 个月, 2 ℃ -8 ℃ 保存时间更长 。
试剂盒内容: | D2400- 50T | D2400-100T |
蛋白酶 K | 1ml | 1ml×2 |
结合液 | 25ml | 50ml |
漂洗液 | 15ml | 15ml×2 |
洗脱液 | 10ml | 20ml |
吸附柱 | 50 个 | 100 个 |
收集管 | 50 个 | 100 个 |
说明书 | 1 份 | 1 份 |
产品简介 :
本试剂盒适合于从血清、细胞上清、淋巴液中提取 DNA 病毒基因组,不适合于 RNA 病毒基因组的提取。使用本试剂盒提取的基因组 DNA 可用于各种常规操作,包括酶切、 PCR 、文库构建、 Southern 杂交等实验。
操作步骤:
使用前请先在漂洗液中加入无水乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。所有离心步骤均为使用台式离心机在室温下离心。
1 、 取病毒上清液 0.5ml , 12000rpm 离心 5min ,尽量吸尽上清使用,弃去沉淀。
2 、 向病毒上清中加入 20ul 的蛋白酶 K ( 10mg/ml ),充分混匀,
3 、 向管中加入 500ul 结合液,充分混匀。再向管中加入 400ul 无水乙醇,充分混匀,此时可能会出现絮状沉淀,不影响 DNA 的提取,可将溶液和絮状沉淀都加入吸附柱中,静置 2min 。(吸附柱的大容积为 750ul ,可分两次加入。一次吸附完离心后再将余下的混合液体加入柱中静置离心。)
4 、 12000rpm 离心 2min ,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
5 、 向吸附柱中加入 600ul 漂洗液 ( 使用前请先检查是否已加入无水乙醇 ) , 12000rpm 离心 1min ,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
6 、 向吸附柱中加入 600ul 漂洗液, 12000rpm 离心 1min ,弃废液,将吸附柱放入收集管中。
7 、 12000rpm 离心 2min ,将吸附柱置于室温或
8 、将吸附柱放入一个干净的离心管中,向吸附膜中央悬空滴加 50ul-100ul 经 65℃ 水浴预热的洗脱液,室温放置 5min , 12000rpm 离心 1min 。
9 、离心所得洗脱液再加入吸附柱中,室温放置 2min , 12000rpm 离心 2min ,即可得到高质量的病毒基因组 DNA 。
注意事项 :
1 、蛋白酶 K 需放置
2 、样品应避免反复冻融,否则会导致提取的 DNA 片段较小且提取量也下降。
3 、若结合液中有沉淀,可在
4 、洗脱缓冲液的体积好不少于 50ul ,体积过小会影响回收效率。洗脱液的 pH 值对洗脱效率也有影响,若需要用水做洗脱液应保证其 pH 值在 8.0 左右 ( 可用 NaOH 将水的 pH 值调至此范围 ) , pH 值低于 7.0 会降低洗脱效率。 DNA 产物应保存在
5 、 DNA 浓度及纯度检测:得到的基因组 DNA 片段的大小与病毒的保存条件和种类等因素有关。 D 260 值为 1.0 相当于大约 50 ug/ml 双链 DNA 、 40 ug/ml 单链 DNA 。 OD 260 /OD 280 比值应为 1.7-1.9 ,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用去离子水,比值会偏低,因为 pH 值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。
6 、如果病毒含量过低,后提取的基因组 DNA 电泳可能无法检测到,但 PCR 等其他实验还会有结果。
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公司简介:
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