组成：

熊猫脏器组织单个核细胞分离液 200mL 

全血及组织稀释液 200mL 

细胞洗涤液 200mL 

单个核细胞分离方法 

1. 制备脏器组织的单细胞悬液。 

2. 取一支适当的离心管，加入与脏器组织单细胞悬液等量的分离液（分离液最少不得少于3 mL，总体积不能超 过离心管的三分之二，否则会影响分离效果）。 

3. 小心吸取单细胞悬液加于分离液液面上，注意保持两液面界面清晰。（可以使用巴氏德吸管吸取单细胞悬液， 然后小心的平铺于分离液上，因为两者的密度差异，将形成明显的分层界面。） 

4. 室温，500~900g，离心20~30min。（根据脏器组织单细胞悬液的量 确定离心条件，单细胞悬液量越大，离心力越大，离心时间越长， 具体离心条件可以自行摸索，以达到*分离效果）。 

5. 离心后，此时离心管中由上至下细胞分四层。*层为稀释液层； *层为环状乳白色单个核细胞层；第三层为透明分离液层；第四 层为红细胞层。 

6. 用吸管小心吸取*层环状乳白色单个核细胞层至另一洁净的 15mL离心管中，向离心管中加入10ml细胞洗涤液洗涤白膜层细胞， 250g，离心10min。 

7. 弃上清，5mL的PBS或细胞清洗液重悬细胞，250g，离心10min。 

8. 重复步骤7 

9. 弃上清，细胞重悬备用。

http://www.solarbio.com/pdf/P4710.pdf 说明书链接