产品名称：过氧化物酶（POD）检测试剂盒
产品英文名：Peroxidase (POD) Assay Kit
产品货号：BC0090                         产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
产品规格：50管/48样                产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；           参考价格：360
库存状态：现货                          
关键字：过氧化物酶试剂盒|POD检测试剂盒

简要介绍：
POD广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。

产品详细描述

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BC0090-50管/48样	360.00元

试剂的组成： 
提取液：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 60mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体×2 瓶，4℃保存；用时每瓶加入 5mL 试剂一；用不完的试剂 4℃保存一周；
试剂三：液体 10mL×1 瓶，4℃保存。

测定意义： POD（EC1.11.1.7）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类 和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。POD 催化 H2O2氧化特定底物， 在 470nm 有特征光吸收。
需自备的仪器和用品： 可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水

操作步骤：
一、粗酶液提取：
1、 细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声 波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 8000g4℃离心 10min， 取上清，置冰上待测。 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、 血清（浆）样品：直接检测。
二、测定步骤和加样表：
测定前将试剂一、二和三 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）放置 10min。在 1mL 玻璃比 色皿中按顺序加入上述试剂，立即混匀并计时，记录 470nm 下 30s 时的吸光值 A1 和 1min30s 后的 吸光值 A2。计算ΔA＝A2-A1。

注意： 
1. 若一次性测定样本较多，可将试剂一、二、三和蒸馏水按比例配成混合液，在 37℃（哺乳动物） 或 25℃（其它物种）放置 10min 以上，测定时加入 15μL 样本和 1055μL 混合液测定。
2. 如果ΔA 小于 0.005，可将反应时间延长到 5min。如果ΔA 大于 0.5，可将样本用提取液稀释后测 定，计算公式中乘以相应稀释倍数。
三、POD 活性计算：
1、 血清（浆）POD 活性
单位定义：每 mL 血清（浆）在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 为一个酶活力单位。 
计算公式：POD（U/mL）=ΔA×V 反总÷V 样÷0.01÷T=7133×ΔA
2、 组织、细菌或细胞 POD 活性
 (1) 按样本蛋白浓度计算
单位定义：每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 为一个酶活力单位。
POD（U/mgprot）＝ΔA×V 反总÷（V 样×Cpr）÷0.01÷T=7133×ΔA÷Cpr
(2) 按样本鲜重计算
单位定义：每 g 组织在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 为一个酶活力单位。 POD（U/g 鲜重）＝ΔA×V 反总÷(W×V 样÷V 样总)÷0.01÷T=7133×ΔA÷W
(3) 按细菌或细胞密度计算
单位定义：每 1 万个细菌或细胞在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 为一个酶活力单位。
POD（U/104cell）＝ΔA×V 反总÷(500×V 样÷V 样总)÷0.01÷T=14.27×ΔA
V 反总：反应体系总体积，1.07mL； V 样：加入样本体积，0.015mL；V 样总：加入提取液体 积，1mL；T：反应时间，1min；Cpr：样本蛋白质浓度，mg/mL；W：样本质量；500：细菌或细 胞总数，500 万。

相关文献：

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《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影响因子:3.712 PMID:
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