产品名称：过氧化物酶（POD）检测试剂盒  微量法
产品英文名：Micro Peroxidase (POD) Assay Kit
产品货号：BC0095                        产地：北京市通州区马驹桥联东U谷85A三楼
产品规格：100管/96样                    产品商标：solarbio
保存与运输：4℃保存或-20℃保存；          参考价格：720
库存状态：现货                          
关键字：过氧化物酶试剂盒 

简要介绍：
POD广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。POD催化H2O2氧化特定底物，在470nm有特征光吸收。

产品详细描述

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BC0095-100管/96样	720.00元

试剂的组成： 
提取液：液体 100mL×1 瓶，4℃保存；
试剂一：液体 20mL×1 瓶，4℃保存；
试剂二：液体 0.2mL×1 瓶，4℃保存；用时每瓶加入 3mL 试剂一，现配现用，可 4℃保存一周；
试剂三：液体 3mL×1 瓶，4℃保存。

产品说明： 
POD（EC1.11.1.7）广泛存在于动物、植物、微生物中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺 类毒性的双重作用。POD 在有过氧化氢存在的情况下，能使愈创木酚发生氧化，生成茶褐色物质，该物质在 470nm 有*光吸收。
需自备的仪器和用品： 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵、冰和蒸馏水

操作步骤：
一、粗酶液提取：
1、 细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104 个）：提取液体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液），超声 波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）； 8000g4℃离心 10min， 取上清，置冰上待测。 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL 提取液），进行冰浴匀浆。8000g4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。
2、 血清（浆）样品：直接检测。

二、测定步骤和加样表：
1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 470nm，分光光度计蒸馏水调零。 2、 测定前将试剂一、二和三在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）放置 10min 以上。 3、 样本测定表

在 EP 管中按顺序加入上述试剂，立即混匀并计时，立即取 200μL 转移至微量玻璃比色皿或 96 孔板中，记录 470nm 下 30s 时的吸光 值 A1 和 1min30s 后的吸光值 A2。计算ΔA＝A2-A1。

POD 活性计算：
用微量玻璃比色皿测定的计算公式如下 

1. 血清（浆）POD 活性

单位的定义：每 mL 血清（浆）在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一个酶活力单位。
POD（U/mL）＝245μL（反应体系）÷1000μL×血清（浆）总体积（1000μL）÷样本体积（5μL）÷0.01×ΔA=4900×ΔA
2、组织 POD 活性
(1) 按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一个酶活力单位。
POD（U/mgprot）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样本体积（5μL）÷0.01×ΔA 测定÷蛋白质浓度（mg/mL） =4900×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每 g 组织在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一个酶活力单位。
POD（U/g 鲜重）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样本体积（5μL）÷0.01×ΔA÷样品质量（g/mL）=4900×ΔA÷ 样品质量（g/mL）
3、细菌或细胞 POD 活性
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一个酶活力单位。
POD（U/mgprot）＝245μL（反应体系） ÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL） ÷样本体积（5μL） ÷0.01×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL） =4900×ΔA÷ 蛋白质浓度（mg/mL）
（2）按细菌或细胞密度计算 
单位的定义：每 1 万个细菌或细胞在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.01 定义为一个酶活力单位。
POD（U/104cell）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样本体积（5μL）÷0.01×ΔA÷细菌或细胞密度（104 cell/mL） =4900×ΔA÷细菌或细胞密度（104 cell/mL）

用 96 孔板测定的计算公式如下

1. 血清（浆）POD 活性

单位的定义：每 mL 血清（浆）在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 定义为一个酶活力单位。
POD（U/mL）＝245μL（反应体系）÷1000μL×血清（浆）总体积（1000μL）÷样本体积（5μL）÷0.005×ΔA=9800×ΔA
2、组织 POD 活性
 (1) 按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 定义为一个酶活力单位。
POD（U/mgprot）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样本体积（5μL）÷0.005×ΔA 测定÷蛋白质浓度（mg/mL） =9800×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL）
（2）按样本鲜重计算
单位的定义：每 g 组织在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 定义为一个酶活力单位。
POD（U/g 鲜重）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样本体积（5μL）÷0.005×ΔA÷样品质量（g/mL）=9800×ΔA÷ 样品质量（g/mL）
3、细菌或细胞 POD 活性
（1）按样本蛋白浓度计算
单位的定义：每 mg 组织蛋白在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 定义为一个酶活力单位。 
POD（U/mgprot）＝245μL（反应体系） ÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL） ÷样本体积（5μL） ÷0.005×ΔA÷蛋白质浓度（mg/mL） =9800×ΔA÷ 蛋白质浓度（mg/mL）
（2）按细菌或细胞密度计算
单位的定义：每 1 万个细菌或细胞在每 mL 反应体系中每分钟 A470 变化 0.005 定义为一个酶活力单位。
POD（U/104 cell）＝245μL（反应体系）÷1000μL×提取酶液总体积（1000μL）÷样本体积（5μL）÷0.005×ΔA÷细菌或细胞密度（104cell/mL） =9800×ΔA÷细菌或细胞密度（104 cell/mL）

注意事项： 
1、 如一次测定的样本数量较多，可将试剂一、二、三和蒸馏水按照比例混合，在 37℃（哺乳动物）或 25℃（其它物种）放置 10min， 测定时加入 240μL 即可。
2、 样本测定值如果小于 0.005，可将反应时间延长到 3-5 分钟，计算时除以反应时间即可；如果高于 0.5，可将样本用提取液进行 稀释。计算时乘以相应的稀释倍数即可。

相关文献：

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《Leveraging Atriplex hortensis choline monooxygenase to improve chilling tolerance in cotton》 作者:Yanan Wang,Chengzhen Liang,Zhigang Meng,Yanyan Li,Peilin Wang,Yuan Wang,Guoqing Sun,Yongping Cai,Shou-Yi Chen,Yi Lin,Rui Zhang,Sandui Guo 期刊:Environmental and Experimental Botany 影响因子:3.712 PMID:
《The Fight Against Panax notoginseng Root-Rot Disease Using Zingiberaceae Essential Oils as Potential Weapons》 作者:Yan-Jiao Yin, Chuan-Jiao Chen, Shi-Wei Guo, Ke-Ming Li, Yu-Nan Ma, Wu-Mei Sun, Fu-Rong Xu, Yong-Xian Cheng and Xian Dong 期刊:Frontier in Immunology 影响因子:4.716 PMID:30337932