一
从硬件外观来看，液质的液相部分（常被称为LC-MS专用液相 / UHPLC）同样由流动相瓶、脱气机、高压输液泵、自动进样器、色谱柱温箱组成。但是因为后端连接质谱离子源，它在硬件设计、使用要求上和普通液相有着本质区别。
液质液相与普通HPLC核心对比表
对比项目 | 普通 HPLC | LC-MS专用液相系统 |
常规流速 | 0.8-1.2mL/min | 0.1-0.5mL/min（ESI源优先） |
缓冲盐选择 | 挥发性无要求 （磷酸盐、硼酸盐、 乙酸铵等均可） | 仅允许挥发性盐 （甲酸铵、乙酸铵等） |
脱气优先级 | 简单脱气即可 | 严格脱气 （气泡直接影响质谱信号） |
管路材质 | PEEK/不锈钢均可 | 优先PEEK管路，减少金属吸附 |
色谱柱规格 | 常规4.6×150mm /250mm, 5μm | 短柱、小粒径 （如2.1×50mm, 2.6μm） 减少扩散，提高灵敏度和分离度 |
?? 磷酸盐、硼酸盐、硫酸盐等不挥发性盐严禁直接上液质。盐无法在离子源高温下气化，会析出固体，严重污染锥孔、离子传输管，后期维护成本极高。
二
流动相是影响目标物色谱保留、峰形、离子化响应强度三大要素的核心。很多人遇到质谱响应低，第一反应怀疑仪器脏了，却忽略了流动相体系选错这个最常见的原因。
甲醇、乙腈、甲酸、挥发性缓冲盐怎么选
有机相：甲醇 VS 乙腈
乙腈：黏度低、系统压力低；洗脱能力强；适合反相体系，正离子模式下很多化合物响应优；缺点：部分极性化合物洗脱过快，保留不足。
甲醇：质子给予能力更强，对于部分碱性化合物，有利于[M+H]+生成；黏度更高，柱压相对偏大。
改性剂：正负离子模式选择逻辑
甲酸、乙酸属于挥发性有机酸，最常用来调节流动相pH。
正离子模式（ESI+）：添加0.1%甲酸，提供大量H?，促进目标物质子化 [M+H]?，显著提升响应。
负离子模式（ESI?）：一般不建议加酸；酸性环境会抑制目标物失去质子生成[M-H]?。负离子常选用氨水、乙酸铵-氨水溶液调节弱碱性环境。
缓冲盐：乙酸铵、甲酸铵
乙酸铵（NH?Ac）：乙酸铵是液质为数不多的“安全缓冲盐”，挥发性好，正负离子模式均有应用。pH缓冲区间：4.0-6.0，中性附近，最常用缓冲盐。缺点：低pH环境下缓冲能力弱。
甲酸铵（NH?HCOO）：pH缓冲区间：2.8-4.8；优先用于正离子模式。优点：相比甲酸，pH更稳定；缺点：偏中性或弱酸性条件下，缓冲能力不足。
?? 所有挥发性缓冲盐，常规推荐5-10mmol/L，上限尽量不要超过20mmol/L；盐浓度越高，离子抑制、源内析出风险越大。
三
常见色谱柱类型以及适用场景
什么是柱流失？
色谱柱键合相（硅烷基团）在高温、极端pH条件下从硅胶载体脱落，随流动相进入质谱离子源，会持续产生背景离子。普通紫外检测器无法检出柱流失，而质谱属于高灵敏度检测器，微量流失物就会造成离子源污染、背景噪音升高等。
液质色谱柱养护避坑清单
1. 避免使用极端 pH（一般 pH 2~8 安全）。
2. 控制柱温，不要超过 40~50℃（高温加速键合相水解）。
3. 使用高纯水（18.2 MΩ·cm）和优质有机相，减少杂质对柱的损害。
4. 每次实验后用高比例有机相充分冲洗（不含盐）。
5. 复杂基质样品（血清、植物提取液）务必配套固相萃取前处理，减少杂质不可逆吸附在柱头。
（不同品牌色谱柱的pH和温度耐受范围差异较大，以产品说明书为准）
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